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雞傳染性支氣管炎病毒(IBV)ELISA檢測試劑盒 極威生物 科研用途

點(diǎn)擊次數(shù):545    發(fā)布時間:2021/6/28 11:03:17

· 上 傳 者: 上海極威生物科技有限公司

· 上傳時間:2021/6/28 11:03:17

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· 文件類型:jpg

· 所屬分類:法規(guī)標(biāo)準(zhǔn)

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· 資料簡介: 本試劑盒只能用于科學(xué)研究,不得用于醫(yī)學(xué)診斷

雞傳染性支氣管炎病毒IBVELISA檢測試劑盒

使用說明書

檢測原理

試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被雞傳染性支氣管炎病毒IBV)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的雞傳染性支氣管炎病毒IBV)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),判斷樣品是否含有雞傳染性支氣管炎病毒IBV)。

樣品收集、處理及保存方法

1.  血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2.  血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。

3.  細(xì)胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4.  組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。

5.  保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

自備物品

1. 酶標(biāo)儀(450nm)

2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3. 37℃恒溫箱

操作注意事項(xiàng)

1.  試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶,這屬于正常現(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再使用。

2.  實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。

3.  預(yù)處理后的樣本無需稀釋,直接取10μL加樣即可。

4.  嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。

5.  所有液體組分使用前充分搖勻。

試劑盒組成

名稱

96孔配置

48孔配置

備注

微孔酶標(biāo)板

96孔

48孔

陰性對照

0.3mL

0.3mL

陽性對照

0.3mL

0.3mL

樣本稀釋液

6mL

3mL

檢測抗體-HRP

10mL

5mL

20×洗滌緩沖液

25mL

15mL

按說明書進(jìn)行稀釋

底物A

6mL

3mL

底物B

6mL

3mL

終止液

6mL

3mL

封板膜

2張

2張

說明書

1份

1份

自封袋

1個

1個

 

試劑的準(zhǔn)備

 20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。

洗板方法

1.  手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體,在吸水紙上拍干,如此洗板5次。

2.  自動洗板機(jī):每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。

操作步驟

1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2. 設(shè)置陰、陽性對照孔和樣本孔,陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照各50μL;

3. 待測樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;

4. 隨后陰、陽性對照孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗原100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。

6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。




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您好!上海極威生物科技有限公司(Shanghai JIwei Biological Technology Co., Ltd.)成立于上海,是一家專業(yè)從事“產(chǎn)品研發(fā)、市場銷售、技術(shù)服務(wù)”為一體的高科技生物技術(shù)公司。極威生物依托國內(nèi)外技術(shù)研發(fā)人才的優(yōu)勢,由留美資深科學(xué)家與數(shù)位國內(nèi)多年從事生物領(lǐng)域研究的博士、碩士等高校生物領(lǐng)域研究人員共同創(chuàng)立,在科學(xué)研究和醫(yī)療檢測領(lǐng)域享有極高的聲譽(yù),經(jīng)過年的努力發(fā)展已成為專業(yè)供應(yīng)各類生物科研用品的公司,長期專注于生物領(lǐng)域,旗下產(chǎn)品種類眾多。極威生物秉承以產(chǎn)品質(zhì)量為根本,以市場需求為導(dǎo)向,以為客戶創(chuàng)造價值為己任的精神,致力于發(fā)展中國的科研事業(yè)。力求為我國生物科技事業(yè)提供更好的更專業(yè)性的技術(shù)服務(wù)和科研產(chǎn)品。自公司成立以來,公司的銷售額保持高速增長,企業(yè)規(guī)模不斷擴(kuò)大,研發(fā)產(chǎn)品包括elisa試劑盒,生化試劑盒,動物血制品,抗體,標(biāo)準(zhǔn)品,生化試劑實(shí)驗(yàn)耗材等10萬余種類,公司長期致力于elisa試劑盒、生化試劑盒的研發(fā),為客戶提供生化試劑盒、ELISA試劑盒、技術(shù)服務(wù)等一系列實(shí)驗(yàn)代測服務(wù)。

   實(shí)驗(yàn)代做服務(wù):酶聯(lián)免疫ELISA、生化測試、液相氣相檢測、Icp-MS測試、載體構(gòu)建、RACE、全基因合成、線粒體測序、熒光定量PCR、基因克隆、定點(diǎn)突變、染色體步移、基因組全序列獲取、環(huán)境微生物多樣性、微生物基因組測序、微生物菌種鑒定、甲基化分析服務(wù),公司本著“質(zhì)量,專業(yè)服務(wù)”的原則,致力于為用戶提供高性價比的試劑盒和檢測服務(wù)。

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