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人血小板源性生長(zhǎng)因子D(PDGF-D)ELISA檢測(cè)試劑盒 @2022使用方法

人血小板源性生長(zhǎng)因子D(PDGF-D)ELISA檢測(cè)試劑盒 @2022使用方法

價(jià)格:電議 型號(hào):

原產(chǎn)地:中國(guó)大陸發(fā)布時(shí)間:2022/11/2 10:20:47

人血小板源性生長(zhǎng)因子D(PDGF-D)ELISA檢測(cè)試劑盒 @2022使用方法試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被人血小板源性生長(zhǎng)因子D(PDGF-D)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育并徹底洗滌。

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  本公司11月2日10時(shí)25分報(bào)道:人血小板源性生長(zhǎng)因子D(PDGF-D)ELISA檢測(cè)試劑盒 @2022使用方法
人血小板源性生長(zhǎng)因子D(PDGF-D)ELISA檢測(cè)試劑盒 @2022使用方法    ,人elisa檢測(cè)試劑盒,小鼠elisa試劑盒,大鼠elisa試劑盒,牛elisa試劑盒,羊elisa試劑盒,豬elisa試劑盒,犬elisa試劑盒,植植物elisa試劑盒,elisa 檢測(cè)試劑盒報(bào)價(jià)

檢測(cè)原理
試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被人血小板源性生長(zhǎng)因子D(PDGF-D)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人血小板源性生長(zhǎng)因子D(PDGF-D)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。
 
樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心 30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘
取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
自備物品
1. 酶標(biāo)儀(450nm)
2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒溫箱
操作注意事項(xiàng)
1. 試劑盒保存在 2-8℃,使用前室溫平衡 20 分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶,這屬于正常現(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再使用。
2. 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
3. 預(yù)處理后的樣本無(wú)需稀釋,直接取 10μL 加樣即可。
4. 嚴(yán)格按照說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。
5. 所有液體組分使用前充分搖勻。

試劑盒組成
名稱 96 孔配置 48 孔配置 備注

微孔酶標(biāo)板

12 孔×8 條 12 孔×4 條

無(wú)

標(biāo)準(zhǔn)品

0.3mL 0.3mL

無(wú)

樣本稀釋液

6mL 3mL

無(wú)

檢測(cè)抗體-HRP

10mL 5mL

無(wú)

20×洗滌緩沖液 25mL 15mL

按說(shuō)明書進(jìn)行稀釋

底物A

6mL 3mL

無(wú)

底物B

6mL 3mL

無(wú)

終止液

6mL 3mL

無(wú)

封板膜

2 張

2 張

無(wú)

說(shuō)明書

1 份

1 份

無(wú)

自封袋

1 個(gè)

1 個(gè)

無(wú)


注:標(biāo)準(zhǔn)品濃度依次為:400、200、100、50、25、0 pg/mL.
試劑的準(zhǔn)備
20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按 1:20 稀釋,即 1 份的 20×洗滌緩沖液加 19 份的蒸餾水。
洗板方法
1. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置 1min 后甩盡孔內(nèi)液體,在吸水紙上拍干,如此洗板 5 次。
2. 自動(dòng)洗板機(jī):每孔注入洗液 350μL,浸泡 1min,洗板 5 次。
操作步驟
1. 從室溫平衡 20min 后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回 4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品 50μL;
3. 待測(cè)樣本孔先加待測(cè)樣本 10μL,再加樣本稀釋液 40μL;
4. 隨后標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體 100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育 60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置 1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板 5 次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6. 每孔加入底物 A、B 各 50μL,37℃避光孵育 15min。
7. 每孔加入終止液 50μL,15min 內(nèi),在 450nm 波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD 值。
結(jié)果判斷
繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線:在 Excel 工作表中,以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo),對(duì)應(yīng)OD 值作縱坐標(biāo),繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線,按曲線方程計(jì)算各樣本濃度值。
試劑盒性能
1. 準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù) R 值,大于等于0.9900。
2. 靈敏度:檢測(cè)濃度小于 1.0 pg/mL。
3. 特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
4. 重復(fù)性:板內(nèi)變異系數(shù)小于 10%、板間變異系數(shù)小于 15%。
5. 貯藏:2-8℃,避光防潮保存。
6. 有效期:6 個(gè)月
免責(zé)聲明
1. 試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實(shí)驗(yàn)或人體實(shí)驗(yàn),否則所產(chǎn)生的一切后果,由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān),本公司概不負(fù)責(zé)。
2. 嚴(yán)格按照說(shuō)明書操作,實(shí)驗(yàn)者違反說(shuō)明書操作,后果由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān)。 

更新時(shí)間:2024/5/24 11:45:35

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