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乙醇脫氫酶(ADH)Elisa檢測試劑盒-價格/代測-極威生物

點擊次數(shù):17237   發(fā)布時間:2021/1/14 22:13:39

 

乙醇脫氫酶(ADH)酶聯(lián)免疫分析試劑盒
使用說明書

本試劑盒僅供研究使用。
檢測范圍
96T
1.2 mU/L -50 mU/L
使用目的
本試劑盒用于測定微生物樣本中乙醇脫氫酶(ADH) 活性。
乙醇脫氫酶(ADH)Elisa檢測試劑盒-價格/代測-GIVEI生物
實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中乙醇脫氫酶(ADH)水平。用純化的乙醇脫氫酶 (ADH)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入乙醇脫氫酶(ADH)再與 HRP 標記的乙醇脫氫酶(ADH)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB HRP 酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的乙醇脫氫酶(ADH)呈正相關。用酶標儀在 450nm 波長下測定吸光度(OD 值),通過標準曲線計算樣品中乙醇脫氫酶(ADH) 活性濃度。
試劑盒組成
1               30 倍濃縮洗滌液               20ml×1                7               終止液               6ml×1                
2               酶標試劑               6ml×1                       8               標準品(80mU/L               0.5ml×1                
3               酶標包被板               12 孔×8                9               標準品稀釋液               1.5ml×1                
4               樣品稀釋液               6ml×1                10               說明書               1                
5               顯色劑 A                6ml×1                11               封板膜               2                
6               顯色劑 B                6ml×1/               12               密封袋 1                
乙醇脫氫酶(ADH)Elisa檢測試劑盒-價格/代測-GIVEI生物
標本要求
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能 馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
40mU/L               5 號標準品                150µl 的原倍標準品加入 150µl 標準品稀釋液
20mU/L               4 號標準品                150µl 5 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液
10mU/L               3 號標準品                150µl 4 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液
5mU/L               2 號標準品                150µl 3 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液
2.5mU/L               1 號標準品                150µl 2 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液
2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣 50µl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl,然后再加待測樣品 10µl(樣品終稀釋度為 5 倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4. 配液:將 20 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 20 倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 后棄去,如此重復 5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑 50µl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同 3。
8. 洗滌:操作同 5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
10 分鐘.
10. 終止:每孔加終止液 50µl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止液后 15 分鐘以內(nèi)進行。
乙醇脫氫酶(ADH)Elisa檢測試劑盒-價格/代測-GIVEI生物
計算
以標準物的濃度為橫坐標,OD 值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD 值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與 OD 值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的 OD 值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。
乙醇脫氫酶(ADH)Elisa檢測試劑盒-價格/代測-GIVEI生物
注意事項
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未
用完,板條應裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。次加樣時間好控制在 5 分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,好做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本 OD 大于標準品孔第孔的 OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋定倍數(shù)(n 倍)后再測定,計算時請后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5. 封板膜只限次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
保存條件及有效期
1.試劑盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6 個月

原創(chuàng)作者:上海極威生物科技有限公司

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