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技術(shù)文章

組織脂褐素含量熒光定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)

點(diǎn)擊次數(shù):18269   發(fā)布時(shí)間:2016/8/29 15:52:42

 主要用途

 

組織脂褐素含量熒光定量檢測試劑是一種旨在通過有機(jī)溶劑萃取可溶性脂褐素分子,直接熒光分光光度儀分析,定量檢測組織樣品脂褐素含量的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。適用于各種組織(動(dòng)物、人體等)裂解懸液的脂褐素含量檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定,檢測準(zhǔn)確。

 

技術(shù)背景

 

脂褐素(lipofusin),又稱為“磨損(wear and tear)”色素,是一種細(xì)胞內(nèi)與年齡相關(guān)的熒光胞漿顆粒色素,主要在有絲分裂后細(xì)胞的繼發(fā)性溶酶體內(nèi)。脂褐素常見于老年人的永恒性非分裂性組織細(xì)胞里,例如心臟、肝臟和神經(jīng)等,尤其在衰老誘導(dǎo)的細(xì)胞退變中聚集增多,特別是萎縮的組織。脂褐素來自于氧化的蛋白和脂質(zhì),成為細(xì)胞衰老中后期的獨(dú)立指征。 基于有機(jī)溶劑可溶性脂褐是丙二醛與游離氨基的物質(zhì)交聯(lián)而成的具有熒光的化合物,有機(jī)溶劑萃取,直接通過熒光分光光度計(jì)(激發(fā)波長350nm,散發(fā)波長435nm)檢測,產(chǎn)生熒光峰值的變化,來測定脂褐素的總含量。

 

產(chǎn)品內(nèi)容

 

清理液(Reagent A    XX毫升

處理液(Reagent B    XX

稀釋液(Reagent C    XX毫升

標(biāo)準(zhǔn)液(Reagent D    XX

產(chǎn)品說明書1

 

保存方式

 

保存標(biāo)準(zhǔn)液(Reagent D在-20冰箱里,避免光照;其余的保存在4冰箱里,處理液(Reagent B、稀釋液(Reagent C和標(biāo)準(zhǔn)液(Reagent D具有腐蝕性和揮發(fā)性,密閉瓶蓋,嚴(yán)格注意操作安全;有效保證6

 

用戶自備

 

:用于樣品處理

1.5毫升離心管:用于標(biāo)準(zhǔn)液配制和樣品制備的容器

2毫升離心管:用于樣品操作的容器

15毫升錐形離心管:用于樣品操作的容器

DOUNCE勻漿器:用于裂解組織細(xì)胞

臺(tái)式離心機(jī):用于樣品操作

比色皿:用于比色分析的容器

分光光度儀:用于比色分析

 

實(shí)驗(yàn)步驟

 

一、樣品準(zhǔn)備

 

1. 手術(shù)取出動(dòng)物組織,并秤重以確定500毫克組織重量 

2. (選擇步驟)放進(jìn)預(yù)冷的15毫升錐形離心管

3. (選擇步驟)加入3毫升清理液(Reagent A清洗1

4. 移入到一個(gè)液氮凍存管

5. 即刻放進(jìn)液氮罐過夜

6. 次日從液氮罐里取出,即刻(*快速度)用研磨棒碾碎組織成粉末狀(注意:切莫使組織凍融

7. 放進(jìn)一個(gè)2毫升離心管

8. 加入XX處理液(Reagent B 

9. 轉(zhuǎn)移到DOUNCE勻漿器

10. 用勻漿棒勻化組織(約40下)

11. 轉(zhuǎn)移到15毫升錐形離心管

12. 加入2毫升用戶自備的

13. 渦旋震蕩10秒,充分混勻

14. 放進(jìn)臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘,速度為2000g

15. 小心移取1升上層液相到新的預(yù)冷的1.5毫升離心管 

16. 置于冰槽里繼續(xù)后續(xù)操作(注意:避免保存過夜)

 

二、標(biāo)準(zhǔn)樣品配制

 

1. 準(zhǔn)備好5個(gè)1.5毫升離心管,標(biāo)記為15號(hào)管

2. 分別加入XX微升稀釋液(Reagent C15號(hào)管

3. 移取XX微升標(biāo)準(zhǔn)液(Reagent D1號(hào)管,混勻

4. 小心移取XX微升1號(hào)管稀釋標(biāo)準(zhǔn)液(Reagent D2號(hào)管,混勻

5. 小心移取XX微升2號(hào)管稀釋的標(biāo)準(zhǔn)液(Reagent D3號(hào)管,混勻

6. 小心移取XX微升3號(hào)管稀釋的標(biāo)準(zhǔn)液(Reagent D4號(hào)管,混勻

7. 15號(hào)管放進(jìn)冰槽里備用;標(biāo)準(zhǔn)管濃度見下表

 

管號(hào)

稀釋液(Reagent C

標(biāo)準(zhǔn)液(Reagent D

測定體系

標(biāo)準(zhǔn)硫酸奎寧含量

1

XX微升

XX微升

XX微克

2

XX微升

XX微升1號(hào)管

XX微克

3

XX微升

XX微升2號(hào)管

XX微克

4

XX微升

XX微升3號(hào)管

XX微克

5

XX微升

0

0

 

三、 標(biāo)準(zhǔn)曲線測定

 

1. 加入XX微升稀釋液(Reagent C到新的比色皿

2. 加入XX微升上述配制的標(biāo)準(zhǔn)液(Reagent D,混勻

3. 即刻放進(jìn)熒光分光光度儀檢測激發(fā)波長350nm,散發(fā)波長435nm:獲得熒光讀數(shù)

4. 重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟13四次

5. 構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線:縱座標(biāo)(Y軸)為熒光讀數(shù);橫座標(biāo)(X軸)為標(biāo)準(zhǔn)硫酸奎寧/等價(jià)脂褐素含量微克

 

四、 樣品測定

 

1. 加入1毫升上述制備的樣品到新的比色皿

2. 即刻放進(jìn)熒光分光光度儀檢測激發(fā)波長350nm,散發(fā)波長435nm:獲得樣品熒光讀數(shù)

3. 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得樣品對應(yīng)脂褐素含量微克

 

五、 含量計(jì)算

 

XX

 

注意事項(xiàng)

 

1. 本產(chǎn)品為25次操作,包括標(biāo)準(zhǔn)樣品

2. 操作時(shí),須戴手套

3. 系統(tǒng)操作時(shí),標(biāo)準(zhǔn)樣品測定只需1

4. 處理液(Reagent B、稀釋液(Reagent C標(biāo)準(zhǔn)液(Reagent D具有腐蝕性和揮發(fā)性,密閉瓶蓋,嚴(yán)格注意操作安全

5. 孵育時(shí),避免光照

6. 通常脂褐素含量表述為:微克/毫克蛋白;微克/毫升;微克/組織重量

7. 本公司提供系列脂褐素檢測試劑產(chǎn)品

 

質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

 

1. 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定

2. 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測敏感

 

使用承諾

 

秉著信譽(yù)至上、客戶滿意、質(zhì)量承諾的宗旨為我們的用戶提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品和服務(wù)。用戶收到貨后,應(yīng)按照產(chǎn)品說明書上的規(guī)定妥善保管并在有效期內(nèi)使用。我們的產(chǎn)品在銷售前已作嚴(yán)格的質(zhì)量鑒定,保證說明書所述的使用效果。在貨到后10天內(nèi)若發(fā)現(xiàn)確屬本產(chǎn)品的質(zhì)量問題,請立即以書面形式(實(shí)驗(yàn)報(bào)告)與本公司聯(lián)系,并將該產(chǎn)品退回,經(jīng)檢驗(yàn)確系產(chǎn)品質(zhì)量所致,本公司負(fù)責(zé)更換產(chǎn)品。如系使用者錯(cuò)誤操作所致,本公司不承擔(dān)由此造成的損失。

 

友情提醒

 

IF IT DOESN’T WORK, RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG

 

 

訂購信息

 

單組分訂購信息

 

編號(hào)名稱規(guī)格

GMS50365.2組織脂褐素含量熒光定量檢測試劑盒20

GMS50365.2A清理液(Reagent A100毫升

GMS50365.2B 處理液(Reagent B50毫升

GMS50365.2C 稀釋液(Reagent C50毫升

GMS50365.2D 標(biāo)準(zhǔn)液(Reagent D5毫升

 

試劑盒訂購信息

 

產(chǎn)品編號(hào)

名稱

規(guī)格

GMS80056.1

細(xì)胞衰老特異性脂褐素靛酚原位染色試劑盒

(適合與紅細(xì)胞分別;不適合人體心肌和小鼠腦組織)

50

GMS80056.2

全組織衰老特異性脂褐素靛酚原位染色試劑盒

10

GMS80056.3

冰凍切片組織衰老特異性脂褐素靛酚原位染色試劑盒

50

GMS80056.4.1

特殊石蠟切片組織衰老特異性脂褐素靛酚原位間接染色試劑盒

10

GMS80056.4.2

特殊石蠟切片組織衰老特異性脂褐素靛酚原位直接染色試劑盒

50

GMS80064.1

細(xì)胞衰老特異性早期脂褐素蘇丹黑原位染色試劑盒(與紅細(xì)胞無法分別)

50

GMS80064.2

全組織衰老特異性早期脂褐素蘇丹黑原位染色試劑盒

10

GMS80064.3

冰凍切片組織衰老特異性早期脂褐素蘇丹黑原位染色試劑盒

50

GMS80064.4.1

特殊石蠟切片組織衰老特異性早期脂褐素蘇丹黑原位間接染色試劑盒

10

GMS80064.4.2

特殊石蠟切片組織衰老特異性早期脂褐素蘇丹黑原位直接染色試劑盒

50

GMS80065.1

細(xì)胞衰老特異性脂褐素尼羅籃原位染色試劑盒(與紅細(xì)胞無法分別)

50

GMS80065.2

全組織衰老特異性脂褐素尼羅籃原位染色試劑盒

10

GMS80065.3

冰凍切片組織衰老特異性脂褐素尼羅籃原位染色試劑盒

50

GMS80065.4.1

特殊石蠟切片組織衰老特異性脂褐素尼羅籃原位間接染色試劑盒

10

GMS80065.4.2

特殊石蠟切片組織衰老特異性脂褐素尼羅籃原位直接染色試劑盒

50

GMS80066.1

細(xì)胞衰老特異性晚期脂褐素堿性品紅

ZIEHL-NEELSEN)原位染色試劑盒

50

GMS80066.2

全組織衰老特異性晚期脂褐素堿性品紅(ZIEHL-NEELSEN)原位染色試劑盒

10

GMS80066.3

冰凍切片組織衰老晚期特異性脂褐素堿性品紅(ZIEHL-NEELSEN)染色試劑盒

50

GMS80066.4.1

特殊石蠟切片組織衰老特異性晚期脂褐素堿性品紅

ZIEHL-NEELSEN)原位間接染色試劑盒

10

GMS80066.4.2

特殊石蠟切片組織衰老特異性晚期脂褐素堿性品紅

ZIEHL-NEELSEN)原位直接染色試劑盒

50

GMS80069.1

細(xì)胞衰老特異性早期脂褐素油性紅原位染色試劑盒(與紅細(xì)胞無法分別)

50

GMS80069.2

全組織衰老特異性早期脂褐素油性紅原位染色試劑盒

10

GMS80069.3

冰凍切片組織衰老特異性早期脂褐素油性紅原位染色試劑盒

50

GMS80069.4.1

特殊石蠟切片組織衰老特異性早期脂褐素油性紅原位間接染色試劑盒

10

GMS80069.4.2

特殊石蠟切片組織衰老特異性早期脂褐素油性紅原位直接染色試劑盒

50

GMS80070.1

細(xì)胞衰老特異性晚期脂褐素鐵還原法(SCHMORL)染色試劑盒

50

GMS80070.2

全組織衰老特異性晚期脂褐素鐵還原法(SCHMORL)染色試劑盒

10

GMS80070.3

冰凍切片組織衰老特異性晚期脂褐素鐵還原法(SCHMORL)染色試劑盒

50

GMS80070.4.1

特殊石蠟切片組織衰老特異性晚期脂褐素鐵還原法(SCHMORL)間接染色試劑盒

10

GMS80070.4.2

特殊石蠟切片組織衰老特異性晚期脂褐素鐵還原法(SCHMORL)直接染色試劑盒

50

GMS80071.1

細(xì)胞衰老特異性晚期脂褐素高碘酸希爾(PAS)法

品紅亞硫酸鹽(FUCHSIN SULFITE原位染色試劑盒

50

GMS80071.2

全組織衰老特異性晚期脂褐素高碘酸希爾(PAS)法

品紅亞硫酸鹽(FUCHSIN SULFITE原位染色試劑盒

10

GMS80071.3

冰凍切片組織衰老晚期特異性脂褐素高碘酸希爾(PAS)法

品紅亞硫酸鹽(FUCHSIN SULFITE原位染色試劑盒

50

GMS80071.4.1

特殊石蠟切片組織衰老特異性晚期脂褐素高碘酸希爾(PAS)法

品紅亞硫酸鹽(FUCHSIN SULFITE原位間接染色試劑盒

10

GMS80071.4.2

特殊石蠟切片組織衰老特異性晚期脂褐素高碘酸希爾(PAS)法

品紅亞硫酸鹽(FUCHSIN SULFITE原位直接染色試劑盒

50

GMS50648.1

細(xì)胞脂褐素含量熒光定量檢測試劑盒

50

GMS50648.2

組織脂褐素含量熒光定量檢測試劑盒

50

原創(chuàng)作者:上海極威生物科技有限公司

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